مقاله همبستگی بین متابولیسم سلولی کورستین و متابولیت گلوکورونید آن و تنش اکسیداتیو (2017 الزویر)

مقدمه

مواد و روش ها

مواد شیمیایی

تجزیه و تحلیل تجمع Q و Q3GA در آدیپوسیت های 3T3-L1 هایپرتروفی شده، پردازش نمونه و اندازه گیری ROS درون سلولی

تجزیه و تحلیل HPLC-DAD-ESI-TOF و تعیین مقدار

نتایج و بحث

نتیجه گیری

Background Quercetin (Q) is one of the most abundant flavonoids in human dietary sources and has been related to the capacity to ameliorate obesity-related pathologies. Quercetin-3-O-β-d-glucuronide (Q3GA) is supposed to be the main metabolite in blood circulation, but the intracellular final effectors for its activity are still unknown. Hypothesis/purpose To identify and quantitate the intracellular metabolites in hypertrophied adipocytes incubated with Q or Q3GA and to correlate them with the intracellular generation of oxygen radical species (ROS). Methods Cytoplasmic fractions were obtained and quercetin metabolites were determined by liquid chromatography coupled to a time-of-flight mass detector with electrospray ionization (HPLC-DAD-ESI-TOF). Intracellular ROS generation was measured by a ROS-sensitive fluorescent probe. Results Both Q and Q3GA were absorbed by hypertrophied adipocytes and metabolized to some extent to Q3GA and Q, respectively, but Q absorption was more efficient (1.92 ± 0.03 µg/µg protein) and faster than that of Q3GA (0.12 ± 0.0015 µg/µg protein), leading to a higher intracellular concentration of the aglycone. Intracellular decrease of ROS correlated with the presence of the most abundant quercetin metabolite. Conclusion Q and Q3GA are efficiently absorbed by hypertrophied adipocytes and metabolized to some extent to Q3GA and Q, respectively. The intracellular decrease of ROS in a hypertrophied adipocyte model treated with Q or Q3GA is correlated with the most abundant intracellular metabolite for the first time. Both compounds might be able to reach other intracellular targets, thus contributing to their bioactivity.

سابقه: کورستین (Q) یکی از فراوان ترین فلاونوئیدهای موجود در منابع غذایی انسان است و با ظرفیت بالقوه ی بیماری های مرتبط با چاقی در ارتباط است. کورستین-3-0-B-O- گلوکورونید (Q3GA) متابولیت اصلی در گردش خون است، اما افکتورهای نهایی داخل سلولی برای فعالیت آن هنوز مشخص نیست.

فرضیه/هدف: شناسایی و اندازه گیری متابولیت های داخل سلولی در آدیپوسیت های هیپرتروفی شده ی انکوبه شده با Q یا Q3GA و ارتباط دادن آن ها با تولید درون سلولی گونه های رادیکال اکسیژن (ROS).

روش ها: فرکشن های سیتوپلاسمی به دست آمده و متابولیت های کورستین با استفاده از کروماتوگرافی مایع همراه با یک آشکارساز time-of-flight با یونیزاسیون الکترواسپری (HPLC-DAD-ESI-TOF) تعیین شدند. تولید درون سلولی ROS با استفاده از یک پروب فلورسنت حساس به ROS اندازه گیری شد.

نتایج: Q و Q3GA هر دو به وسيله آديپوسيت هاي هيپرتروفي شده جذب شدند و تاحدی به ترتیب به Q3GA و Q متابوليزه شدند، اما جذب Q بيشتر (92/1- 03/0 میکروگرم/میکروگرم پروتئين) و سريع تر از Q3GA (12/0-0015/0 میکروگرم/میکروگرم پروتئين)، که منجر به افزایش غلظت درون سلولی آگلیکون شد. کاهش درون سلولی ROS با وجود فراوان ترین متابولیت یعنی کورستین ارتباط دارد.

نتيجه گيري: Q و Q3GA به خوبی به آديپوسيت هاي هيپرتروفي شده جذب شده و تا حدودي به ترتیب به Q3GA و Q متابوليزه شدند. کاهش درون سلولی ROS در یک مدل آدیپوسیت هیپرتروفی شده ی تیمار شده با Q یا Q3GA با فراوان ترین متابولیت درون سلولی ارتباط دارد. هر دو ترکیب ممکن است بتوانند به سایر اهداف درون سلولی رسیده و به فعالیت زیستی آنها کمک کنند.