مقاله مهارکردن دیواره سلولی آنتی ژن های کمپیلوباکتر در برابر لاکتوکوکوس لاکتیس (2016 Frontiersin)

 

 

عنوان فارسی مقاله مهارکردن دیواره سلولی آنتی ژن های کمپیلوباکتر در برابر لاکتوکوکوس لاکتیس
عنوان انگلیسی مقاله Cell Wall Anchoring of the Campylobacter Antigens to Lactococcus lactis
فهرست مطالب مقدمه

مواد و روش ها

سویه های باکتری، پرایمرها، پلاسمیدها، شرایط محیط و رشد

دست ورزی DNA

دست ورزی کل DNA

ساخت پلاسمیدهای نوترکیب برای تکثیر پروتئین نوترکیب

ساخت وکتور شاتل pUWM1000

ساخت وکتورهای حامل ژن های کمپیلوباکتر با قطعات DNA کد کننده موتیف اتصال به دیواره ژن YndF مربوط به L. lactis

ساخت وکتور کدکننده آنتی ژن های کمپیلوباکتر با موقعیت سیتوپلاسمی

ترانسفورم کردن E. coli و Lactococcus lactis

تولید آنتی بادی های پلی کلونال و پروتئین های نوترکیب

وسترن بلات و SDS-PAGE

تعیین موقعیت سلولی پروتئین های هیبرید- روش ایمونوفلورسانس

بررسی مقاومت مرغ و پاسخ های ایمنی

رشد سویه حامل(Lactococcus lactis IL 1403 حامل ژن های CjaA یا rCjaAD کمپیلوباکتر ژژونی) برای ایمن سازی مرغ

رژیم ایمنی زایی و به چالش کشیدن

بررسی جذب ایمنی وابسته به آنزیم (ELISA)

تهیه آنتی ژن

روش الایزا

آنالیزهای بیوانفورماتیکی

پیش بینی ساختار پروتئین

پیش بینی اپی توپ ها

آنالیزهای آماری

نتایج

پیش بینی ساختار پروتئین

CjaA

CjaD

پیش بینی اپی توپ ها

ساخت سویه های L. lactis بیان کننده ژن های C. jejuni

موقعیت یابی پروتئین های CjaA و rCjaAD

ایمنی زایی مرغ با L. lactis تولید کننده پروتئین هیبرید rCjaAD سطح سلولی

پاسخ آنتی بادی های روده ای و سرم

آنالیز ایجاد مقاومت

بحث

نمونه مقاله انگلیسی Campylobacter jejuni is the most frequent cause of human food-borne gastroenteritis and chicken meat is the main source of infection. Recent studies showed that broiler chicken immunization against Campylobacter should be the most efficient way to lower the number of human infections by this pathogen. Induction of the mucosal immune system after oral antigen administration should provide protective immunity to chickens. In this work we tested the usefulness of Lactococcus lactis, the most extensively studied lactic acid bacterium, as a delivery vector for Campylobacter antigens. First we constructed hybrid protein – CjaA antigen presenting CjaD peptide epitopes on its surface. We showed that specific rabbit anti-rCjaAD serum reacted strongly with both CjaA and CjaD produced by a wild type C. jejuni strain. Next, rCjaAD and CjaA were fused to the C-terminus of the L. lactis YndF containing the LPTXG motif. The genes expressing these proteins were transcribed under control of the L. lactis Usp45 promoter and their products contain the Usp45 signal sequences. This strategy ensures a cell surface location of both analyzed proteins, which was confirmed by immunofluorescence assay.
نمونه ترجمه فارسی

باکتری کمپیلوباکتری ژژونی اصلی ترین عامل بیماری باکتریایی گاستروانتریت ناشی از غذا در انسان و گوشت مرغ منبع اصلی عفونت می باشد. مطالعات اخیر نشان می دهد که ایمن سازی مرغ ها علیه کمپیلوباکتر موثرترین راه برای کاهش موارد ابتلای انسانی به این عامل بیماری زا می باشد. القای سیستم ایمنی مخاطی پس از استفاده از آنتی ژن، بایستی مرغ ها را ایمن سازد. در این مطالعه ما کارایی لاکتوکوکوس لاکتیس که بیشترین مطالعه در بین لاکتیک اسید باکتری ها بر روی آن انجام شده، را به منظور استفاده به عنوان وکتور انتقال آنتی ژن های کمپیلوباکتر ژژونی مورد بررسی قرار دادیم. در ابتدا پروتئین هیبرید ساخته شد که آنتی ژن CjaA سه اپی توپ مربوط به آنتی ژن CjaD را بر روی سطح خود نشان می دهد.  ما مشاهده کردیم که آنتی بادی ویژه  Anti-rCjaAD خرگوشی هم با پروتئین CjaA و هم با CjaD تولیدی توسط سویه وحشی کمپیلوباکتر ژژونی واکنش می دهد. سپس ژن rCjaAD و CjaA به انتهای C ژن YndF مربوط به لاکتوکوکوس لاکتیس که حاوی موتیف LPTXG است، اضافه شد. ژن های بیان کننده این پروتئین ها تحت کنترل پروموتر Usp45 لاکتوکوکوس لاکتیس رونویسی شد و محصول آنها حاوی توالی پیام Usp45 بود. این استراتژی موجب هدایت بهتر پروتئین ها به سطح سلول می شود که با استفاده از روش ایمونوفلورسانس تایید شد.

سال انتشار 2016
ناشر Frontiersin
مجله  مرزها در میکروبیولوژی – Frontiers in Microbiology
کلمات کلیدی  دمین اتصال به دیواره LPXTG، کمپیلوباکتر، واکسن، ایمنی زایی مرغ
 صفحات مقاله انگلیسی 18
صفحات ترجمه مقاله 35
مناسب برای رشته زیست شناسی
مناسب برای گرایش  میکروبیولوژی، ژنتیک و علوم سلولی و مولکولی
توضیحات این مقاله ترجمه شده و فایل تایپ شده با فرمت ورد آن آماده خریداری و دانلود میباشد.
دانلود مقاله انگلیسی ○ دانلود رایگان مقاله انگلیسی با فرمت pdf (کلیک کنید)
خرید ترجمه فارسی ○ خرید ترجمه آماده این مقاله با فرمت ورد (کلیک کنید)
سایر مقالات این رشته ○ مشاهده سایر مقالات رشته زیست شناسی (کلیک کنید)

 

 

دیدگاهتان را بنویسید